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Prepare a filter sterilized 2 mM CaCl 2 solution for V. Cells are most competent when actively growing. Preparation of Electrocompetent Bacterial Cells DAY 2, Afternoon Harvest the bacteria with a sterile inoculating loop making sure not to pierce or break the surface of the agar. One 2 mm diameter bacterial mass is sufficient for a single transformation.

Typically, impotenza requires scraping the surface of the thin lawn with the inoculating loop two or three times. Several samples typically between may be collected from the same plate. E coli da anal the bacterial mass in 1 ml ice-cold 2 mM CaCl 2 for V. Discard the supernatant, resuspend the bacterial pellet in the same volume of ice-cold 2 mM E coli da anal 2 or sterile ddH 2 O, and repeat the centrifugation step as done before twice more for a total of three washes.

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